大发体育魏永伟博士课题组在SCRV研究方面取得重要进展

　　近日，魏永伟博士课题组接连在水产领域国际顶级期刊《Aquaculture》（SCI一区TOP, IF 4.242）发表两篇高水平论文，阐述了鳜弹状病毒（Siniperca chuatsi Rhabdovirus，SCRV）在传播屏障分子机制等方面取得的最新进展，其建立的SCRV反向遗传系统和SCRV微基因组分析系统将为SCRV疫苗研究提供强有力的技术保障。
　　“西塞山前白鹭飞，桃花流水鳜鱼肥”。自古以来，鳜一直是我国特有的淡水名贵鱼类。我国鳜鱼年产量30多万吨，产值超过200亿元。然而，随着人工养殖规模扩大，疫病成为鳜鱼产业的主要危害，造成巨大的经济损失，已成为阻碍鳜鱼可持续发展的重要因素。SCRV是其重要的病害之一。研究团队从疫苗株的分离到反向遗传系统的建立，突破了SCRV弱毒疫苗研究的核心技术瓶颈。在国家要求“核心技术要自主可控”的大政方针下，研究团队取得的进步显得更加具有价值和意义。该研究拥有完全自主知识产权。
　　研究团队分离、纯化和鉴定了一株SCRV S3，克隆了其全基因组，并对其体内外生物学特性进行了系统研究（图1）。S3基因组全长11582bp。细胞嗜性研究表明温度是限制SCRV 传播的重要屏障，初步揭示了其传播屏障的分子机制。同时，系统研究了SCRV在不同条件下的热稳定性和环境稳定性（图2）。初步揭示了SCRV在不同条件下失活的分子机制，其失去活性的部分原因是由于基因组RNA断裂所致。研究结果显示SCRV在体外的稳定性高于目前已用作疫苗载体的水泡性口炎病毒（VSV），说明SCRV作为疫苗载体将具有更好的稳定性，利于疫苗的保存和运输。

图1 S3全基因组进化树关系图

图2  SCRV S3在培养基中不同温度下的稳定性

　　“工欲善其事,必先利其器”。SCRV弱毒疫苗的获得途径至今还局限于将强毒株在体外传代或从自然界分离天然弱毒株。这些传统方法不仅耗时费力，而且具有非常大的偶然性，无法快速应对疫病的发生。团队建立了稳定的、高效的SCRV反向遗传系统和SCRV微基因组分析系统（图3、4），为开展SCRV减毒疫苗建立了强有力的技术平台。拯救的rS3与原S3株生物学特性一致，建立的微基因组S3miniEGFP在靶细胞内能模拟SCRV的转录和蛋白表达。反向遗传系统和微基因组分析系统的建立将为SCRV疫苗研究提供强有力的技术保障。

图3  SCRV S3反向遗传系统及微基因组结构模式图

图4  SCRV S3及拯救的rS3体内外生长特征

　　团队近期发表的相关文章：
　　（1）Liu, X.Y., Zhang, X.D., Xu, Z.D., Huang, Z.Y., Zhong, J.Y., Zhu, Y.Z., Wei, Y.W(通讯作者). Isolation, genomic and biological characterizations of a rhabdovirus from mandarin fish (Siniperca chuatsi). Aquaculture, 2023, 563, 738894.
　　（2）Liu, X.Y., Zhang, X.D., Xu, Z.D., Huang, Z.Y., Zhong, J.Y., Zhu, Y.Z., Wei, Y.W (通讯作者). Recovery of Siniperca chuatsi rhabdovirus from cloned cDNA. Journal of fish diseases，2023，46, 127-135.
　　（3）Xu, Z.D., Huang Z.Y., Zhong, J.Y., Zhu, Y.Z., Liu, X.Y., Wei, Y.W (通讯作者). Thermal and environmental stability of Siniperca chuatsi Rhabdovirus. Aquaculture, 2023, 568, 739308.
                               

作者简介
　　第一作者：刘晓瑜,大发体育医学院教师，博士，生物医学工程专业，以第一作者发表论文10余篇。
　　第一作者：许禛东，大发体育医学院 临床医学专业191班本科生，中共党员。获校综合二等奖学金2次，综合三等奖学金1次，学习优秀奖3次，浙江省大学生挑战杯赛三等奖1次。主持院级、校级和国家级课题各1项，发表论文1篇。
　　通讯作者：魏永伟，大发体育医学院教师，博士，主要从事反向遗传系统、疫苗及新型疫苗载体研究。主持完成国家自然科学基金和浙江省自然科学基金等多项项目，发表论文30余篇。

文字：廖庆 编辑：张冉　严许媖